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小鼠Elisa試劑盒實驗注意事項
更新時間:2024-06-26   點擊次數:970次
  小鼠ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中關鍵的一步,稍有不慎將導致實驗滿盤皆輸,如何安全,快捷的處理樣本,樣本處理小鼠ELISA實驗使用注意事項及試驗操作關鍵希望能幫助大家。 小鼠ELISA試劑盒使用方法:
 
  1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
 
  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
 
  3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
 
  4、組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
 
  5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
  9、底物請避光保存。
 
  小鼠ELISA試劑盒實驗操作注意要點:
 
  血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。
 
  混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存按小鼠ELISA試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。
 
  對于科研人員來說小鼠ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果操作不合理,也會很大程度上影響實驗的準確度。實驗結束時我們是否能獲得有意義而且準確的信息,這在很大程度上取決于操作結果的正確與否。
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