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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程血清為何要稀釋
更新時間:2020-02-13   點(diǎn)擊次數(shù):2624次

每一盒ELISA試劑盒試劑盒里面都有一份對應(yīng)的說明書,而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋份額,為何樣本都需求稀釋呢?今日的文章中,公司將為您剖析:為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需求稀釋?

在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋?有兩個原因:
1.比賽按捺對比明顯,應(yīng)稀釋比賽物;
2.以下降非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。
血清稀釋用一般的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽,血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確認(rèn),但也不必一點(diǎn)點(diǎn),你做一個預(yù)實(shí)驗(yàn)即可,挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的ELISA中陰性孔OD在1.0,這么作出來的曲線對比靈敏。
 
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的過程:
1、先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確認(rèn)一個參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板
2、再用一定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進(jìn)行孵育后洗刷,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗刷后,加底物溶液顯色,停止反應(yīng)后分別測定O.D值,挑選O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要挑選那個O.D值稍大于1.0,而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值要求<0.1-0.2。也便是要求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有明顯差別。

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